ELISA试剂盒操作经验总结分享给刚刚接触ELISA实验的同学,因为许多同学才接触虽然掌握基本理论知识但是许多实践中需要注意的并不知道。
1、实验第一步也是最重要一步必须戴手套穿好工作衣,严格执行消毒隔离制度保证自己的人身安全。
2、必须用121℃高压蒸汽将剩余样品及废弃物应经灭菌30分钟,或者用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。
3、同批号试剂组不能混用。
4、每次实验留一不加任何试剂孔作为空白调零孔在最后加底物溶液及2N H2SO4。5、洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。
6、使用蒸馏水和电子天平进行确定(由于蒸馏水不含杂质,温度环境为20%左右时,lmL的水可以看作是lg、200 L的水可以看作是0.2g将一把微量加样器都应该将其最高量程和最低量程进行确定,要确保微量加样器的准确性。
7、ELISA试剂盒操作经验总结在使用微量加样器时,吸取不同瓶子中液体更换枪头
8、吸取液体时速度不易太快,以免产生气泡导致吸取的量不够准确。
9、手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15~30s,不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。
10、甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。
11、加样后及时放入孵箱,如果标本较多时,最好分批操作。严格按照说明书进行操作时,防止孵育时间人为延长,而导致非特异性结合紧附于反应孔周围难以清洗彻底。
12、底物为TMB时必须避免与皮肤相接触。
13、终止液2tool的浓硫酸应尽量避免接触皮肤因为具有腐蚀性。
14、测量时先用此孔调OD值至零。
ELISA试剂盒虽然操作简便但是仍有需要注意的地方,ELISA试剂盒操作经验总结希望能帮助到大家。