什么温度最适合培养细胞是许多才接触ELISA实验同学的疑惑。高灵敏ELISA试剂盒在高温情况下肯定是不适合进行细胞培养。因为高温会导致酶的灭活、类脂质破坏、核分裂的破坏。产生凝固酶使细胞发生凝固导致蛋白质变性，所以体外培养细胞时一定要避免高温。

一般哺乳类及禽类细胞体外培养的适宜温度是37~38℃，细胞抗低温的能力要胜过抗热的能力，但是高灵敏ELISA试剂盒在低温情况下其代谢活力及核分裂会有所降低。当温度低于0℃时会影响细胞代谢，但并无伤害作用。置于23~25℃（鱼类细胞适宜）时仍能生存和生长，但速度有所减缓。