体外培养细胞时，一般单个或极少数分散状态细胞是不能存活的（或生长不良）必需加入一定量的其他细胞达一定的密度才能生长得好，加入的细胞称为饲养细胞。 用细胞融合术建立杂交瘤细胞时，饲养细胞的加入是不可缺少的，常用的有正常小鼠腹腔巨噬细胞、脾细胞、胸腺细胞，也有人用经过照射或丝裂霉素处理的纤维母 细胞，如3T3或Putler等。
一、 实验材料
1.1 RPMI-1640完全培养液：具体配法见实验方法—细胞融合2.3。
1.2 HAT培养液或HT培养液：具体配法见实验方法—细胞融合2.4和2.5。
1.3 实验动物： Balb/c或昆明种健康小鼠（雌雄均可）1只，6～10周龄，体重18～ 22克，本院动物中心繁殖和饲养。每只小鼠可取得3～5×106 的滋养细胞，可供铺6块板用，应在融合或克隆前1～2天制备。
1.4 离心机一台，血细胞计数板，无菌塑料离心管，96孔细胞培养板。小鼠解剖台板或平皿；无菌眼科剪刀、镊子各数把；大镊子一个；止血钳两个。一次性5ml注射器2套。
二、实验方法
2.1 将Balb/c小鼠拉颈脱臼处死，浸泡于75%酒精5分钟，随即放入超净工作台内，腹部朝上放于平皿内或固定于解剖板上。
2.2  用眼科镊子夹起小鼠腹部皮肤，用剪刀剪一小口，注意切勿剪破腹膜，
以免腹腔液外流。然后用剪刀向上下两侧做钝性分离，充分暴露腹膜。用酒精棉球擦拭腹膜消毒。
2.3  用注射器吸取5ml RPMI-1640基础培养液，注入小鼠腹腔，注射器停
留不动，晃动小鼠或反复抽吸几次。用原注射器抽回腹腔内液体，注入离心管。如此反复操作3～4次。
2.4  1000rpm离心10min，弃上清。
2.5  用20～50ml完全培养液重悬细胞，100μl/孔滴加到培养板，置培养
箱备用。
2.6 观察饲养细胞的生长状态，一般生长良好的饲养细胞和巨嗜细胞呈梭形或多角形、细胞透亮、折光性强。