关于细胞复苏是细胞培养中不可缺少一步。很多刚接触的同学容易犯很多错误，例如：水浴锅未预热或者没有预热到37℃；水浴锅内冻存管太多，导致传热不佳，使融化时间延长；离心前忘记平衡，导致离心机损坏和细胞丢失；一次复苏细胞过多，太匆忙忘记更换吸头和吸管，导致细胞交叉污染；其实做实验提前计划好，这样做实验时候才会有条不紊，很多同学事前没有一个完整计划开始实验后手忙脚乱经常犯一些不该有的小错误。

关于细胞复苏原则：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。

具体操作
一. 实验前准备：
1.将水浴锅预热至37℃
2.用75％酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。
3.在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等等。
二．取出冻存管：
1.根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。
2.从液氮罐中取出细胞盒，取出所需的细胞，同时核对管外的编号。
三．关于细胞复苏迅速解冻：
1.迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻，并要不断的摇动，使管中的液体迅速融化。
2.约1-2min后冻存管内液体完全溶解，取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁，再拿入超净台内。
四.平衡离心:
用架盘天平平衡后，放入离心机中3000r/min 离心3min
五.制备细胞悬液：
1.吸弃上清液。
2.向离心管内加入10ml培养液，吹打制成细胞悬液。
六.细胞计数：
细胞浓度以5×105/ml为宜。
七.培养细胞
将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内，将培养瓶放入37℃和5％CO2的培养箱内2-4小时（或者24-48小时）后换液继续培养培养，换液的时间由关于细胞复苏细胞情况而定。