本方法是由Maago6s}an和丁~y (1}$2)的方法修改过来的。为厂把肌球蛋白纯化成纯品，要用一纤维素进行阴离子交换层析:混有肌动蛋自的肌球蛋白可以作为初材料。在下面给出丁推备枉材料以及川DEAE一纤维素进行纯化的方法。注意:两种阴离子交换树脂需要不同的缓冲液，不能互相替代

1）准备DEAF柱和材料平衡缓冲液配成2x的贮掖口用低0以1:1混合配成匀浆及洗涤缓冲液。加额外的}Omunull3.. IMIaPPi和dH}U配成肛眯蛋白一DFr1E透析缓冲液。用它和2x浓缩的盐溶液以}:1混合，配成溶液作为梯度生成装里的高盐部分。或TT这些成分的浓度会影响柱组分的即测量值，而这种策略可以保证这些成分在梯度中维持相同的浓度。会氧化，所以要在临实验前配制这些缓冲液，并要放在空气密封而且只含极少量空气的容器中

2)把DE-52悬浮在15倍体积的}.5rtxaVL HCI中，搅拌30分钟。为保证一致性，所有的BF.AE都要处理，甚至包括新从制造商处购买的预先膨胀了的材料.在过滤翻斗（处理和平衡)E-52，用一个真空瓶加速这个过释，不要让离子交换树脂污染你的pFi电极:在测量pH值前过滤溶液，或者使用叫试纸

3)用胡20洗DEAE直至pH超过4,0a

4)在i5倍体积的5mo1L Naflfi中悬浮DEAF,搅拌3}分钟。

5)用dH20洗DEAF

6)重复酸和dH2fl这两步

7)用浓缩的((2 x)柱缓冲液滴定到合适的州值。倍体积的缓冲液换3次可能比较合适，但是平衡与否应该通过比较起始平衡缓冲液和从沉降了的柱床上取的上清的电导率和flea值来检验。用n}m平衡L1F,dlE需要特殊的考虑事项，在下1}1的非肌肉肌球蛋白的纯化方法中会具体说明、

9)用平衡了准备一个2Scrn x bOcm的柱子(用合适的管路)。

10)用合适的管路做一个1L的梯度生成器每个杯子加大约1.05L1 x柱缓冲液到梯度生成器的杯子中。

b.通过瞬时打开阀门然后关_t来赶走阀门和管路中的空气在另一个杯子中加1L高盐缓冲液。

  高盐缓冲液ollL NaPPi，pf-I7.0nolf L Na1V3其中含0. SmoVL

d。去掉多余的缓冲液使梯度生成器两边的溶液高度相等。

e，在产生梯度前打开杯子间的阀门。确证柱子顶部的密封完全而可靠。逍过使用窄的管子以减少死体积、避免在柱子顶部有过录的缓冲液一保证柱子能以柱床材料制造商推荐的合适的流速工作、

f。从梯度生成器的低盐和高盐杯子中保留小部分样品。使用这部分样品来校正电导率测量值，这样就可以通过组分的号码或体积(见下文步骤5)来知道梯度的盐浓度。