融合悬浮细胞的步骤与其电穿孔的很类似，只是在进行高强度脉冲前后。必须用低幅、高频电场(介电电泳场)使细胞排成一条链。对悬浮细胞进行电融合的基本步骤在下面的操作方法描述也可以用高强电脉冲融合贴壁细胞。操作步骤与贴壁细胞进行电穿孔基本相似。
1)用融合介质(FM)洗悬浮细胞两次，然后悬于FM中。洗涤细咆时，在台式离心机1000r/min下离心3min,得到细胞沉淀。然后，弃去上清将细胞悬于新鲜FM介质中融合介质(FM)
2mmol/LHEPES
1 mmol/L
280mmol/L甘露醇
调节pH至7,3
2)将悬浮细胞转移到相应的融合室内假如要使两种不同的细胞彼此触合，转移前要充分混合。
3)启动介电电泳场，其振幅通常小于200V/cm,频率在2MHz以内(可能需要用显微镜检测细胞是否排成一条链，调节振幅和频率以达到最佳效果。
4)比介电电泳场开约1分钟后关掉，立即应用融合脉冲，其振幅数量级是1KV/cm脉冲宽度小于l。在进行融合脉冲后立即再次启动介电电泳场，常规让其开启约2分钟电场和脉冲宽皮依细胞种类的不同而不同，必须实验测定
5)关掉介电电场。在细胞在样品池静置10分钟