细胞爬片的步骤
一、 爬片的准备
1、爬片可用一般的盖玻片,也可用专用爬片;
2、应用盖玻片,可根据自己的需要剪裁成合适的大小,以备置于6孔板、12孔板或24孔板;
3、将剪裁好的爬片,置于浓硫酸中浸泡并过夜,第二天先用自来水冲洗20遍,再用三蒸水冲洗3遍,放在饭盒或者培养皿中烘干后进行高压消毒。
这里有个细节,培养板最好买一次性的养细胞的板子,可省去以上步骤。在1、 泡酸过夜
2、 冲洗,烘干(1、2步骤与前大致相同)后,还应该钴60照射,否则会污染细胞。单纯紫外线照射,并不保险。取片子的镊子也需要高压消毒。
二、培养板的准备
1、 泡酸过夜
2、 冲洗,烘干(1、2步骤与前大致相同)
3、 放入超净工作台用紫外线照1~2小时就可以用了(在照之前可以将爬片一并放入,若细胞贴壁能力不强,可经多聚赖氨酸浸片后放入。贴壁能力强的话,就可以省略了,进行紫外线消毒)
三、细胞爬片
1、 胰酶消化细胞后计数
2、 根据自己的需要选择合适的细胞密度种入培养板内即可
3、 第二天即可进行干预措施
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