免疫组化之返蓝
“返蓝”,又叫“蓝化”,因为苏木素染液为弱酸性染液,呈棕红色,但在弱碱状态下颜色可从棕红色变成蓝色,也就是细胞核在光镜下观察到的颜色。这种经过弱碱性条件处理的过程被称为“蓝化”。蓝化后的标本一定要在光镜下镜检分色程度,以保证苏木素染色的质量。(本人经历:有时候掌握不好的时候可能会反复的蓝化,分色,再染色,在蓝化……)
蓝化作用多数是采用在稀释的氨水(0.5-1%)中浸泡30秒到1分钟,或者直接自来水冲洗5-10分钟(本人经历:可不要拿着切片就在流水下冲洗,是切片放到缸子里,水龙头开着温柔的冲洗,其实只是简单的浸泡就可以了,冲洗还有一个很重要的作用就是把胞浆上的附着的浮色给冲走,得到干净的背景),也有的实验室使用碳酸锂饱和液等碱性溶液瞬间蓝化。
但是如果用mayer苏木素染色时一种特殊情况,染色后不需要分色,可直接进行蓝。
蓝化作用多数是采用在稀释的氨水(0.5-1%)中浸泡30秒到1分钟,或者直接自来水冲洗5-10分钟(本人经历:可不要拿着切片就在流水下冲洗,是切片放到缸子里,水龙头开着温柔的冲洗,其实只是简单的浸泡就可以了,冲洗还有一个很重要的作用就是把胞浆上的附着的浮色给冲走,得到干净的背景),也有的实验室使用碳酸锂饱和液等碱性溶液瞬间蓝化。
但是如果用mayer苏木素染色时一种特殊情况,染色后不需要分色,可直接进行蓝。
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