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南京金益柏wb细胞收集实验方法
作者:管理员    发布于:2016-10-10 09:41:38    文字:【】【】【
摘要:南京金益柏wb细胞收集实验方法,针对WB,南京金益柏特意详细列出了具体实验的方法以及步骤,下面就是实验的过程
  南京金益柏wb细胞收集实验方法,针对WB,南京金益柏特意详细列出了具体实验的方法以及步骤,下面就是实验的过程:
  WB收集细胞:

  将细胞培养基弃掉,用PBS清洗两次,使用胰酶消化细胞或细胞刮,将细胞悬浊液离心1000rpm/5min,弃上清,保留底层细胞。如要裂解细胞6孔板(99ulRIPA+1ulPMSF),细胞培养皿(198ulRIPA+2ulPMSF),若要做磷酸化蛋白则加如1ul抑制磷酸化蛋白降解抑制剂,加入细胞裂解液后用移液器将细胞吹匀,冰上静置5min,离心4℃ 12500g/5min,吸取上清液,置于-80℃冰箱;若不裂解细胞,将细胞置于-80℃冰箱。

南京金益柏wb细胞收集实验方法

  普通PCR收集细胞:
  将细胞培养基弃掉,用PBS清洗两次,使用胰酶消化细胞或细胞刮,将细胞悬浊液离心1000rpm/5min,弃上清,保留底层细胞。将细胞置于-20℃冰箱。
  qRT-PCR收集细胞:
  将细胞培养基弃掉,用PBS清洗两次,使用胰酶消化细胞或细胞刮,将细胞悬浊液离心1000rpm/5min,弃上清,保留底层细胞。加入1ml TRIZOL,置于-80℃冰箱。(注意:本实验需使用耗材和试剂都为无RNA酶,PBS必须高压,离心管和枪头必须无酶)
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