抗体及细胞培养
(1)问:CST抗体应该如何保存?
答:将CST抗体的原始管储存的-20°C冰箱内,不要分装。因为抗体存放在含有50%的甘油缓冲液中,所以,即使抗体在-20°C时,仍然是液体状态,不要但是因为反复冻融而降解,具体储存温度请参考产品说明书。
(2)问:我要做流式,不知选择什么品牌抗体?
答:根据多方数据统计,主要是BD为主流, eBioscience为可替换,但是eBioscience 性价比比较高。
(3)问:抗体用单抗好还是多抗好?
答:般来说单抗的特异性好,杂带少;多抗通常便宜点,二抗标记基本用HRP、AP、FITC。
(4)问:抗体产品的基本应用?
答:ELISA、Dot Blot、Western Blot、IF、IP、ChIP。
(5)问:如何选用特殊细胞系培养基?
答:培养某一类型细胞没有固定的培养条件,在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之,首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。
(6)问:冷冻管应如何解冻?
答:取出冷冻管后,须立即放入37℃水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管之爆裂。
(7)问:何时须更换培养基?
答:视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。